Dados do Trabalho

Título

Papel da enzima SCD1 no surgimento do carcinoma hepatocelular e no perfil de resistência à quimioterapia

Introdução

O carcinoma hepatocelular é diagnosticado em mais de meio milhão de pessoas todos os anos com taxa de sobrevida após 5 anos de 19,6%, podendo chegar a 2,5% em casos avançados (Chidambaranathan-Reghupaty et al., 2021) 1. A enzima SCD1 (estearoil-CoA desaturase 1) é uma enzima lipogênica central para a síntese de ácidos graxos monoinsaturados. Estudos sugerem que ela está associada a predisposição genética à hepatocarcinogênese, enquanto que a supressão desta pode reduzir a proliferação em linhagens de células de hepatocarcinoma de forma dependente de Akt ( de Lima Luna & Forti,2021) .

Objetivo

Avaliar o perfil de resistência que as células HuH7 do carcinoma hepatocelular apresentam aos quimioterápicos Sunitinib e Doxorrubicina e descrever as vias moleculares associadas ao mecanismo de resistência.

Métodos

Ensaio de Colônia: As células foram semeadas em placas de 6 poços e divididas em dois grupos. Um grupo foi tratado com ácidos graxos insaturados nas concentrações de 10uM, 25uM, 50uM, 75uM, 100uM, 500uM por 7 dias, sendo realizada a troca do meio de cultura suplementado com ácidos graxos a cada 48 horas. Ao final de uma semana as células foram tratadas com o quimioterápico Sunitinib nas mesmas concentrações. O outro grupo de células teve o meio de cultura trocado a cada 48 horas sem adição ácidos graxos e foram tratadas ao final de 7 dias com o quimioterápico Sunitinib.
Um segundo tratamento foi realizado seguindo o mesmo protocolo, porém as células foram tratadas com o quimioterápico Doxorrubicina. Após o tratamento, as células foram lavadas com PBSA e 1ml de formaldeído a 10% foi adicionado nas placas. As colônias formadas foram coradas com solução de cristal violeta a 0,05%, documentadas com fotos e contadas.
Cultura celular: Foram utilizadas as células do carcinoma hepatocelular HUH7 cultivadas em meio Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM).
Ácidos graxos: Foi utilizado o ácido octadec-9-enóico cuja forma molecular é C17H33COOH e peso molecular 282.46u.

Resultados

Foi possível observar uma menor citotoxicidade induzida pelo quimioterápico no grupo de células tratadas com ácidos graxos quando comparado ao grupo que foi tratado apenas com o quimioterápico, corroborando a hipótese de que a maior oferta de ácidos graxos insaturados para a célula mimetizando a superexpressão da enzima SCD1 pode estar na base do mecanismo de resistência que estes tumores apresentam.

Conclusões

A maior oferta de ácidos graxos insaturados para a célula é mediada pela enzima SCD1, a qual fornece ácidos graxos insaturados para as vias do AKT, PI3K e Wnt/ Beta-catenina. Uma vez ativas essas vias promovem proliferação celular e inibição da apoptose, mecanismos os quais podem estar na base do perfil de resistência que essas células apresentam. A melhor caracterização das vias moleculares associadas e dos detalhes dos mecanismos de resistência são os objetivos dos estudos subsequentes.

Palavras-chave

Carcinoma hepatocelular; quimioterapia, resistência.

Financiador do resumo

CNPQ

Área

Estudo Clínico - Tumores do Aparelho Digestivo Alto